久久久亚洲一区,欧美一区二区 综合免费,国产肛交在线观看,97在线 |国产

歡迎進(jìn)入上海聯(lián)祖生物科技有限公司網(wǎng)站!
13482402338
技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當(dāng)前位置:首頁(yè)  -  技術(shù)文章  -  神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC實(shí)驗(yàn)報(bào)告

神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC實(shí)驗(yàn)報(bào)告

更新時(shí)間:2024-05-30點(diǎn)擊次數(shù):2540

神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


TEL:021-61210612

掃碼加微信

91精品国产色综合久久不粉嫩 | 蜜臀天堂AV在线| 日韩欧美一级大片巧露| 国产原创,中文无码| 美女黄色成人视频黄页| 日本成人电影免费一区二区三区| 蜜臂网在线观看| 亚洲 欧美 日本 一区| 2018年高清无码一区二区| 久久免费精品视频老逼| 精品无碼中| 午夜激情视频网络在线观看| 久久不卡日韩不卡| 欧美日韩操p| 欧美白鸡巴男女| 亚洲最强av合集| 久久青青毛片高清视频| 亚洲官网黄色av| 大香蕉国产视屏| 国产黄片在哪看| 大香蕉伊人猎奇| 久热久色在线| 亚欧精品青青艹| 色情欧美亚洲一区| 天堂精品a| 精品自拍有限公司| 日本加勒比久久精品| 夫妻3p一区二区三区| 好骚综合亚洲视频| 日本伦理片网站久久久久久| 日本欧美三区| 一级美女日逼视频免费播放| 亚洲免费av资源在线观看| av白丝一区| 色哟哟一区二区三| 免费一级v好看的国产网站| 日本中文字幕精品在线观看| 91福利,成人视频| 日本无码抽B费费看| 亚洲Ww高日本| 日韩免费视频-|